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pML107酵母CAS9和gRNA表达质粒
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pML107酵母CAS9和gRNA表达质粒
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基本信息
产品名称：
pML107酵母CAS9和gRNA表达质粒
产品编号：
P1662
规格：
10μl质粒/300μl菌液
原核抗性：
氨苄青霉素Amp
筛选标记：
LEU2
克隆菌株：
大肠杆菌Stbl3
培养条件：
37℃
质粒简介：
pML107是一个酵母CAS9和gRNA表达质粒。
质粒图谱：
质粒序列：
点击查看序列
LOCUS Exported 12366 bp ds-DNA circular SYN 03-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..12366
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
CDS complement(664..1758)
/codon_start=1
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/product="3-isopropylmalate dehydrogenase, required for
leucine biosynthesis"
/label=LEU2
/note="yeast auxotrophic marker"
/translation="MSAPKKIVVLPGDHVGQEITAEAIKVLKAISDVRSNVKFDFENHL
IGGAAIDATGVPLPDEALEASKKADAVLLGAVGGPKWGTGSVRPEQGLLKIRKELQLYA
NLRPCNFASDSLLDLSPIKPQFAKGTDFVVVRELVGGIYFGKRKEDDGDGVAWDSEQYT
VPEVQRITRMAAFMALQHEPPLPIWSLDKANVLASSRLWRKTVEETIKNEFPTLKVQHQ
LIDSAAMILVKNPTHLNGIIITSNMFGDIISDEASVIPGSLGLLPSASLASLPDKNTAF
GLYEPCHGSAPDLPKNKVNPIATILSAAMMLKLSLNLPEEGKAIEDAVKKVLDAGIRTG
DLGGSNSTTEVGDAVAEEVKKILA"
promoter complement(1759..2166)
/gene="S. cerevisiae LEU2"
/label=LEU2 promoter
rep_origin complement(2467..2922)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3089..3107
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 3194..3860
/gene="S. cerevisiae TDH3"
/label=GAP promoter
/note="promoter for glyceraldehyde-3-phosphate
dehydrogenase"
regulatory 3889..3898
/regulatory_class="other"
/note="vertebrate consensus sequence for strong initiation
of translation (Kozak, 1987)"
CDS 3895..7998
/codon_start=1
/product="Cas9 (Csn1) endonuclease from the Streptococcus
pyogenes Type II CRISPR/Cas system"
/label=Cas9
/note="generates RNA-guided double strand breaks in DNA"
/translation="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK
NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES
FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK
FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL
ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ
IGDQYADLFLAAKNLSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR
QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL
RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG
NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY
FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD
SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER
LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM
QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR
HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY
LYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP
SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH
VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL
NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT
EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK
ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI
TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE
LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD
ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL
DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGD"
CDS 8008..8028
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
/label=SV40 NLS
/translation="PKKKRKV"
terminator 8056..8243
/gene="S. cerevisiae ADH1"
/label=ADH1 terminator
/note="transcription terminator for the S. cerevisiae
alcohol dehydrogenase 1 (ADH1) gene"
terminator 8361..8380
/label=SUP4 terminator
/note="transcription terminator for the S. cerevisiae SUP4
tRNA gene"
promoter complement(8462..8730)
/label=SNR52 promoter
/note="promoter for the S. cerevisiae small nucleolar RNA
gene SNR52"
rep_origin complement(9202..9790)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(9961..10821)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(10822..10926)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
rep_origin 10953..12299
/label=2u ori
/note="yeast 2u plasmid origin of replication"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatcga ctacgtcgtt aaggccgttt ctgacagagt aaaattcttg agggaacttt
241 caccattatg ggaaatggtt caagaaggta ttgacttaaa ctccatcaaa tggtcaggtc
301 attgagtgtt ttttatttgt tgtatttttt tttttttaga gaaaatcctc caatatataa
361 attaggaatc atagtttcat gattttctgt tacacctaac tttttgtgtg gtgccctcct
421 ccttgtcaat attaatgtta aagtgcaatt ctttttcctt atcacgttga gccattagta
481 tcaatttgct tacctgtatt cctttacatc ctcctttttc tccttcttga taaatgtatg
541 tagattgcgt atatagtttc gtctacccta tgaacatatt ccattttgta atttcgtgtc
601 gtttctatta tgaatttcat ttataaagtt tatgtacaaa tatcataaaa aaagagaatc
661 tttttaagca aggattttct taacttcttc ggcgacagca tcaccgactt cggtggtact
721 gttggaacca cctaaatcac cagttctgat acctgcatcc aaaacctttt taactgcatc
781 ttcaatggcc ttaccttctt caggcaagtt caatgacaat ttcaacatca ttgcagcaga
841 caagatagtg gcgatagggt tgaccttatt ctttggcaaa tctggagcag aaccgtggca
901 tggttcgtac aaaccaaatg cggtgttctt gtctggcaaa gaggccaagg acgcagatgg
961 caacaaaccc aaggaacctg ggataacgga ggcttcatcg gagatgatat caccaaacat
1021 gttgctggtg attataatac catttaggtg ggttgggttc ttaactagga tcatggcggc
1081 agaatcaatc aattgatgtt gaaccttcaa tgtaggaaat tcgttcttga tggtttcctc
1141 cacagttttt ctccataatc ttgaagaggc caaaacatta gctttatcca aggaccaaat
1201 aggcaatggt ggctcatgtt gtagggccat gaaagcggcc attcttgtga ttctttgcac
1261 ttctggaacg gtgtattgtt cactatccca agcgacacca tcaccatcgt cttcctttct
1321 cttaccaaag taaatacctc ccactaattc tctgacaaca acgaagtcag tacctttagc
1381 aaattgtggc ttgattggag ataagtctaa aagagagtcg gatgcaaagt tacatggtct
1441 taagttggcg tacaattgaa gttctttacg gatttttagt aaaccttgtt caggtctaac
1501 actacctgta ccccatttag gaccacccac agcacctaac aaaacggcat cagccttctt
1561 ggaggcttcc agcgcctcat ctggaagtgg aacacctgta gcatctatag cagcaccacc
1621 aattaaatga ttttcgaaat cgaacttgac attggaacga acatcagaaa tagctttaag
1681 aaccttaatg gcttcggctg tgatttcttg accaacgtgg tcacctggca aaacgacgat
1741 cttcttaggg gcagacatta gaatggtata tccttgaaat atatatatat atattgctga
1801 aatgtaaaag gtaagaaaag ttagaaagta agacgattgc taaccaccta ttggaaaaaa
1861 caataggtcc ttaaataata ttgtcaactt caagtattgt gatgcaagca tttagtcatg
1921 aacgcttctc tattctatat gaaaagccgg ttccggcgct ctcacctttc ctttttctcc
1981 caatttttca gttgaaaaag gtatatgcgt caggcgacct ctgaaattaa caaaaaattt
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