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首页 > 质粒载体 > 酵母系列载体 > pML104酵母CAS9和gRNA表达质粒
pML104酵母CAS9和gRNA表达质粒
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pML104酵母CAS9和gRNA表达质粒
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基本信息
  • 产品名称： pML104酵母CAS9和gRNA表达质粒
  • 产品编号： P1661
  • 规格： 10μl质粒/300μl菌液
  • 原核抗性： 氨苄青霉素Amp
  • 筛选标记： URA3
  • 克隆菌株： 大肠杆菌Stbl3
  • 培养条件： 37℃
  • 质粒简介：                pML104是一个酵母细胞CAS9和gRNA表达基因敲除质粒。
  • 质粒图谱：
  • 质粒序列： 点击查看序列
    LOCUS       Exported               11240 bp ds-DNA     circular SYN 03-DEC-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..11240
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         CDS             1..4113
                         /codon_start=1
                         /product="N-terminal portion of Streptococcus pyogenes Cas9
                         (Zetsche et al., 2015)"
                         /label=Cas9
                         /translation="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK
                         NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES
                         FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK
                         FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL
                         ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ
                         IGDQYADLFLAAKNLSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR
                         QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL
                         RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG
                         NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY
                         FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD
                         SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEEKEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER
                         LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM
                         QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR
                         HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY
                         LYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP
                         SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH
                         VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL
                         NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT
                         EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK
                         ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI
                         TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE
                         LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD
                         ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL
                         DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGDEGA"
         CDS             4114..4134
                         /codon_start=1
                         /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
                         40) large T antigen"
                         /label=SV40 NLS
                         /translation="PKKKRKV"
         terminator      4162..4349
                         /gene="S. cerevisiae ADH1"
                         /label=ADH1 terminator
                         /note="transcription terminator for the S. cerevisiae 
                         alcohol dehydrogenase 1 (ADH1) gene"
         terminator      4467..4486
                         /label=SUP4 terminator
                         /note="transcription terminator for the S. cerevisiae SUP4 
                         tRNA gene"
         promoter        complement(4568..4836)
                         /label=SNR52 promoter
                         /note="promoter for the S. cerevisiae small nucleolar RNA 
                         gene SNR52"
         rep_origin      complement(5308..5896)
                         /direction=LEFT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(6067..6927)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(6928..7032)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
         rep_origin      7059..8401
                         /label=2u ori
                         /note="yeast 2u plasmid origin of replication"
         promoter        8663..8878
                         /gene="S. cerevisiae URA3"
                         /label=URA3 promoter
         CDS             8879..9682
                         /codon_start=1
                         /gene="S. cerevisiae URA3"
                         /product="orotidine-5'-phosphate decarboxylase, required 
                         for uracil biosynthesis"
                         /label=URA3
                         /note="yeast auxotrophic marker, counterselectable with 
                         5-fluoroorotic acid (5-FOA)"
                         /translation="MSKATYKERAATHPSPVAAKLFNIMHEKQTNLCASLDVRTTKELL
                         ELVEALGPKICLLKTHVDILTDFSMEGTVKPLKALSAKYNFLLFEDRKFADIGNTVKLQ
                         YSAGVYRIAEWADITNAHGVVGPGIVSGLKQAAEEVTKEPRGLLMLAELSCKGSLSTGE
                         YTKGTVDIAKSDKDFVIGFIAQRDMGGRDEGYDWLIMTPGVGLDDKGDALGQQYRTVDD
                         VVSTGSDIIIVGRGLFAKGRDAKVEGERYRKAGWEAYLRRCGQQN"
         rep_origin      complement(9813..10268)
                         /direction=LEFT
                         /label=f1 ori
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        10540..11206
                         /gene="S. cerevisiae TDH3"
                         /label=GAP promoter
                         /note="promoter for glyceraldehyde-3-phosphate 
                         dehydrogenase"
    ORIGIN
            1 atggacaaga agtattctat cggactggac atcgggacta atagcgtcgg gtgggccgtc
           61 atcactgacg agtacaaggt gccctctaag aagttcaagg tgctcgggaa caccgaccgg
          121 cattccatca agaaaaatct gatcggagct ctcctctttg attcagggga gaccgctgaa
          181 gcaacccgcc tcaagcggac tgctagacgg cggtacacca ggaggaagaa ccggatttgt
          241 taccttcaag agatattctc caacgaaatg gcaaaggtcg acgacagctt cttccatagg
          301 ctggaagaat cattcctcgt ggaagaggat aagaagcatg aacggcatcc catcttcggt
          361 aatatcgtcg acgaggtggc ctatcacgag aaatacccaa ccatctacca tcttcgcaaa
          421 aagctggtgg actcaaccga caaggcagac ctccggctta tctacctggc cctggcccac
          481 atgattaagt tcagaggcca cttcctgatc gagggcgacc tcaatcctga caatagcgat
          541 gtggataaac tgttcatcca gctggtgcag acttacaacc agctctttga agagaacccc
          601 atcaatgcaa gcggagtcga tgccaaggcc attctgtcag cccggctgtc aaagagccgc
          661 agacttgaga atcttatcgc tcagctgccg ggtgaaaaga aaaatggact gttcgggaac
          721 ctgattgctc tttcacttgg gctgactccc aatttcaagt ctaatttcga cctggcagag
          781 gatgccaagc tgcaactgtc caaggacacc tatgatgacg atctcgacaa cctcctggcc
          841 cagatcggtg accaatacgc cgaccttttc cttgctgcta agaatctttc tgacgccatc
          901 ctgctgtctg acattctccg cgtgaacact gaaatcacca aggcccctct ttcagcttca
          961 atgattaagc ggtatgatga gcaccaccag gacctgaccc tgcttaaggc actcgtccgg
         1021 cagcagcttc cggagaagta caaggaaatc ttctttgacc agtcaaagaa tggatacgcc
         1081 ggctacatcg acggaggtgc ctcccaagag gaattttata agtttatcaa acctatcctt
         1141 gagaagatgg acggcaccga agagctcctc gtgaaactga atcgggagga tctgctgcgg
         1201 aagcagcgca ctttcgacaa tgggagcatt ccccaccaga tccatcttgg ggagcttcac
         1261 gccatccttc ggcgccaaga ggacttctac ccctttctta aggacaacag ggagaagatt
         1321 gagaaaattc tcactttccg catcccctac tacgtgggac ccctcgccag aggaaatagc
         1381 cggtttgctt ggatgaccag aaagtcagaa gaaactatca ctccctggaa cttcgaagag
         1441 gtggtggaca agggagccag cgctcagtca ttcatcgaac ggatgactaa cttcgataag
         1501 aacctcccca atgagaaggt cctgccgaaa cattccctgc tctacgagta ctttaccgtg
         1561 tacaacgagc tgaccaaggt gaaatatgtc accgaaggga tgaggaagcc cgcattcctg
         1621 tcaggcgaac aaaagaaggc aattgtggac cttctgttca agaccaatag aaaggtgacc
         1681 gtgaagcagc tgaaggagga ctatttcaag aaaattgaat gcttcgactc tgtggagatt
         1741 agcggggtcg aagatcggtt caacgcaagc ctgggtacct accatgatct gcttaagatc
         1801 atcaaggaca aggattttct ggacaatgag gagaaagagg acatccttga ggacattgtc
         1861 ctgactctca ctctgttcga ggaccgggaa atgatcgagg agaggcttaa gacctacgcc
         1921 catctgttcg acgataaagt gatgaagcaa cttaaacgga gaagatatac cggatgggga
         1981 cgccttagcc gcaaactcat caacggaatc cgggacaaac agagcggaaa gaccattctt
         2041 gatttcctta agagcgacgg attcgctaat cgcaacttca tgcaacttat ccatgatgat
         2101 tccctgacct ttaaggagga catccagaag gcccaagtgt ctggacaagg tgactcactg
         2161 cacgagcata tcgcaaatct ggctggttca cccgctatta agaagggtat tctccagacc
         2221 gtgaaagtcg tggacgagct ggtcaaggtg atgggtcgcc ataaaccaga gaacattgtc
         2281 atcgagatgg ccagggaaaa ccagactacc cagaagggac agaagaacag cagggagcgg
         2341 atgaaaagaa ttgaggaagg gattaaggag ctcgggtcac agatccttaa agagcacccg
         2401 gtggaaaaca cccagcttca gaatgagaag ctctatctgt actaccttca aaatggacgc
         2461 gatatgtatg tggaccaaga gcttgatatc aacaggctct cagactacga cgtggaccac
         2521 atcgtccctc agagcttcct caaagacgac tcaattgaca ataaggtgct gactcgctca
         2581 gacaagaacc ggggaaagtc agataacgtg ccctcagagg aagtcgtgaa aaagatgaag

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