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首页 > 质粒载体 > 枯草杆菌载体 > pIEFBPR
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基本信息
  • 产品名称: pIEFBPR
  • 产品编号: P1421
  • 规格: 10μl质粒/300μl菌液
  • 复制子: ColE1 Ori
  • 质粒分类: 枯草杆菌质粒;枯草整合质粒;枯草分泌质粒
  • 质粒大小: 8965bp
  • 原核抗性: 氨苄青霉素Amp
  • 克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
  • 培养条件: 37℃,有氧,LB
  • 质粒简介:            pIEFBPR质粒是一个枯草整合型分泌载体,该质粒的参考文献:mazF, a novel counter-selectable marker for unmarked chromosomal manipulation in Bacillus subtilis            ColE1 ori, ColE1 replication origin; amp, ampicillin-resistance marker; spc, spectinomycin-resistance marker; lacI, lac-repressor-encoding gene; Pspac, Pspac promoter; mazF, E.coli toxin gene; Plpp, promoter of E.coli lpp gene; mazE, E.coli antitoxin gene; DR, directly-repeated sequence; amyE-front and amyE-back, upstream and downstream sequences of the B.subtilis amyE gene, respectively; bpr-front and bpr-back, upstream and downstream sequences of the B.subtilis bpr gene, respectively. All of the DNA sequences located between the amyE-front and amyE-back or the bpr-front and bpr-back allow integration into the chromosome of B.subtilis via a double-crossover event, resulting in selection for spectinomycin-resistance. The unique restriction enzyme sites are highlighted in blue.
  • 质粒图谱:
  • 质粒序列: 点击查看序列
    LOCUS       Exported                8965 bp ds-DNA     circular SYN 15-SEP-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 8965)
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Sep 15, 2017 from MiaoLingPlasmid
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..8965
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         rep_origin      4..459
                         /direction=RIGHT
                         /label=f1 ori
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        626..644
                         /label=T7 promoter
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
         misc_feature    692..1697
                         /label=bpr-front
                         /note="upstream of Bacillus subtilis bpr gene"
         misc_feature    1728..1852
                         /label=DR sequence
         CDS             complement(1900..2982)
                         /codon_start=1
                         /gene="lacI"
                         /product="lac repressor"
                         /label=lacI
                         /note="The lac repressor binds to the lac operator to 
                         inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 
                         relieved by adding lactose or 
                         isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
                         /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
                         NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
                         EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
                         EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
                         MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
                         YIPPSTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
                         ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
         CDS             complement(3232..3567)
                         /codon_start=1
                         /label=mazF
                         /note="Escherichia coli toxin MazF"
                         /translation="MVSRYVPDMGDLIWVDFDPTKGSEQAGHRPAVVLSPFMYNNKTGM
                         CLCVPCTTQSKGYPFEVVLSGQERDGVALADQVKSIAWRARGATKKGTVAPEELQLIKA
                         KINVLIG"
         CDS             4179..4931
                         /codon_start=1
                         /product="spectinomycin adenyltransferase; selectable 
                         either in Escherichia coli or Bacillus subtilis"
                         /label=spc
                         /translation="LNTYEQINKVKKILRKHLKNNLIGTYMFGSGVESGLKPNSDLDFL
                         VVVSEPLTDQSKEILIQKIRPISKKIGDKSNLRYIELTIIIQQEMVPWNHPPKQEFIYG
                         EWLQELYEQGYIPQKELNSDLTIMLYQAKRKNKRIYGNYDLEELLPDIPFSDVRRAIMD
                         SSEELIDNYQDDETNSILTLCRMILTMDTGKIIPKDIAGNAVAESSPLEHRERILLAVR
                         SYLGENIEWTNENVNLTINYLNNRLKKL"
         misc_feature    4933..5057
                         /label=DR sequence
         misc_feature    5197..6235
                         /label=bpr-back
                         /note="downstream of Bacillus subtilis bpr gene; homologous
                         arm for recombination"
         misc_feature    6450..6758
                         /label=mazE
         CDS             complement(7218..7806)
                         /codon_start=1
                         /label=ColE1 ori
                         /note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
                         /translation="LRSFFSARNLLLANKKTTATSGGLFAGSRATNSFSEGNWLQQSAD
                         TKYCPSSVAVVRPPLQELCSTAYIPRSANPVTSGCCQWR*VVSYRVGLKTIVTG*GAAV
                         GLNGGFVHTAQLGANDLHRTEIPTA*AMRKRHASRREKGGQVSGKRQGRNRRAHEGASR
                         GKRLVSL*SCRVSPPLT*ASIFVMLVRGAEPME"
         CDS             complement(7977..8837)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(8838..8942)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
    ORIGIN
            1 ctgacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga
           61 ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg
          121 ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat
          181 ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg
          241 ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata
          301 gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt
          361 tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat
          421 ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaatttc cattcgccat tcaggctgcg
          481 caactgttgg gaagggcgat cggtgcgggc ctcttcgcta ttacgccagc tggcgaaagg
          541 gggatgtgct gcaaggcgat taagttgggt aacgccaggg ttttcccagt cacgacgttg
          601 taaaacgacg gccagtgagc gcgcgtaata cgactcacta tagggcgaat tgggtaccgg
          661 gccccccctc gagttaacct gcaggcgcgc ctttgatggg tatcggtatt gctactgggg
          721 aaaatcgcgc ggcagaggca gcaaaaaaag caatttccag cccgcttctt gaagcggcca
          781 ttgacggtgc gcaaggcgtc ctcatgaaca tcactggagg aacaaacctc agcctatatg
          841 aggttcagga agcagcagac attgtcgctt cggcgtctga tcaagacgta aacatgattt
          901 tcggttctgt tattaatgaa aatctaaaag atgagattgt ggtgacagtg attgcaaccg
          961 gctttatcga acaagagaag gacgtgacga agcctcagcg cccaagctta aatcaaagca
         1021 tcaaaacaca caatcaaagt gttccgaagc gtgacgcaaa acgtgaggaa cctcagcagc
         1081 agaacacagt aagccgtcat acttcacagc cggctgatga tacgcttgac atcccgacat
         1141 tcttaagaaa ccgtaataaa cgcggctaat gtaaaggaca aaatcgtttt cgattttgtc
         1201 ttttttgttt ttctcttcac acttccttct tataaagtct ttttccctat tgctttcctt
         1261 cgcttagtaa caaaacagat aattagaccc atttattttt gtgacatttt tatcattttc
         1321 atatatatgg aaattgaatg acatgaaacg acaatatctg taattcagat tgtctacagt
         1381 taatatacag cgatgttctg acaaaccatt cattattaaa aggagggacg acactttttt
         1441 taaaaagcat gttgaaaaag ggggatgaaa atgaggaaaa aaacgaaaaa cagactcatc
         1501 agctctgttt taagtacagt tgtcatcagt tcactgctgt ttccgggagc agccggggca
         1561 agcagtaaag tcacctcacc ttctgttaaa aaggagcttc aatctgcgga atccattcaa
         1621 aacaagattt cgagttcatt aaagaaaagc tttaaaaaga aagaaaaaac gacttttctg
         1681 attaaattta aagatctatc gatgctagcc atggtcgacg cggccgcaaa attgaaaaaa
         1741 tggtggaaac acttttttca atttttttgt tttattattt aatatttggg aaatattcat
         1801 tctaattggt aatcagattt tagaaaacaa taaacccttg cataggggga tctccggagt
         1861 ttaaaccgcg gatcctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg
         1921 ggaaacctgt cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg
         1981 cgtattgggc gccagggtgg tttttctttt caccagtgag acgggcaaca gctgattgcc
         2041 cttcaccgcc tggccctgag agagttgcag caagcggtcc acgctggttt gccccagcag
         2101 gcgaaaatcc tgtttgatgg tggttgacgg cgggatataa catgagctgt cttcggtatc
         2161 gtcgtatccc actaccgaga tatccgcacc aacgcgcagc ccggactcgg taatggcgcg
         2221 cattgcgccc agcgccatct gatcgttggc aaccagcatc gcagtgggaa cgatgccctc
         2281 attcagcatt tgcatggttt gttgaaaacc ggacatggca ctccagtcgc cttcccgttc
         2341 cgctatcggc tgaatttgat tgcgagtgag atatttatgc cagccagcca gacgcagacg
         2401 cgccgagaca gaacttaatg ggcccgctaa cagcgcgatt tgctggtgac ccaatgcgac
         2461 cagatgctcc acgcccagtc gcgtaccgtc ttcatgggag aaaataatac tgttgatggg
         2521 tgtctggtca gagacatcaa gaaataacgc cggaacatta gtgcaggcag cttccacagc
         2581 aatggcatcc tggtcatcca gcggatagtt aatgatcagc ccactgacgc gttgcgcgag
         2641 aagattgtgc accgccgctt tacaggcttc gacgccgctt cgttctacca tcgacaccac
         2701 cacgctggca cccagttgat cggcgcgaga tttaatcgcc gcgacaattt gcgacggcgc
         2761 gtgcagggcc agactggagg tggcaacgcc aatcagcaac gactgtttgc ccgccagttg
         2821 ttgtgccacg cggttgggaa tgtaattcag ctccgccatc gccgcttcca ctttttcccg
         2881 cgttttcgca gaaacgtggc tggcctggtt caccacgcgg gaaacggtct gataagagac
         2941 accggcatac tctgcgacat cgtataacgt tactggtttc atcaaaatcg tctccctccg
         3001 tttgaatatt tgattgatcg taaccagatg aagcactctt tccactatcc ctacagtgtt
         3061 atggcttgaa caatcacgaa acaataattg gtacgtacga tctttcagcc gactcaaaca
         3121 tcaaatctta caaatgtagt ctttgaaagt attacatatg taagatttaa atgcaaccgt
         3181 tttttcggaa ggaaatgatg acctcgtttc caccggaatt agcttgcatg cctacccaat
         3241 cagtacgtta attttggctt taatgagttg taattcctct ggggcaactg ttcctttctt
         3301 cgttgctcct cttgcccgcc aggcgatact ttttacctga tcagctaacg ctacgccatc
         3361 acgttcctga ccggataaaa caacttcgaa cggatatcct tttgattgcg ttgtacaagg
         3421 aacacacaga cacatacctg ttttgttgtt gtacatgaaa ggactcagga caacagctgg
         3481 acgatgtcca gcttgctcgc taccttttgt cgggtcaaaa tcaacccaaa tcagatcgcc
         3541 catatcgggt acgtatcggc ttaccatacc tgcttcctcc ttaagcttaa ttgttatccg
         3601 ctcacaattc cacacattat gccacacctt gtagataaag tcaacaactt tttgcaaaat
         3661 ttttcaggaa ttttagcaga ggttgttctg gatgtagaac aaaacatctt t

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