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TAL3393斑马鱼基因哺乳表达质粒
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TAL3393斑马鱼基因哺乳表达质粒
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基本信息
产品名称:
TAL3393斑马鱼基因哺乳表达质粒
产品编号:
P1091
规格:
10μl质粒/300μl菌液
启动子:
CMV promoter
复制子:
ori,F1 ori
终止子:
bGH poly(A) signal
质粒分类:
基因文库质粒;其它基因质粒;鱼源基因质粒
质粒大小:
8058bp
质粒标签:
N-3xFLAG,N-SV40 NLS,C-FokI cleavage domain
原核抗性:
氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
筛选标记:
杀稻瘟菌素blast
克隆菌株:
XL1 Blue等大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
293T等哺乳细胞
备注:
高拷贝质粒
质粒简介:
TAL3393质粒是一个表达斑马鱼基因的真核表达质粒,CMV promoter启动ZebrafishCommunity-vasa-right基因的表达。
TAL3393质粒的参考文献是
Targeted gene disruption in somatic zebrafish cells using engineered TALENs
.
质粒图谱:
质粒序列:
点击查看序列
LOCUS Exported 8058 bp ds-DNA circular SYN 16-八月-2017
KEYWORDS TAL3393
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8058
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/note="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/note="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 907..972
/codon_start=1
/product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an
enterokinase cleavage site"
/note="3xFLAG"
/translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"
CDS 979..999
/codon_start=1
/locus_tag="
"
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/note="SV40 NLS"
/note="
"
/protein_id="
"
/translation="PKKKRKV"
misc_feature 1020..3312
/note="ZebrafishCommunity-vasa-right"
CDS 3319..3906
/codon_start=1
/product="nonspecific DNA cleavage domain of the FokI
endonuclease (Li et al., 1992)"
/note="FokI cleavage domain"
/note="must dimerize to be catalytically active"
/protein_id="
"
/translation="QLVKSELEEKKSELRHKLKYVPHEYIELIEIARNSTQDRILEMKV
MEFFMKVYGYRGKHLGGSRKPDGAIYTVGSPIDYGVIVDTKAYSGGYNLPIGQADEMQR
YVEENQTRNKHINPNEWWKVYPSSVTEFKFLFVSGHFKGNYKAQLTRLNHITNCNGAVL
SVEELLIGGEMIKAGTLTLEEVRRKFNNGEINF"
polyA_signal 4019..4243
/note="bGH poly(A) signal"
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 4289..4717
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4731..5061
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 4912..5047
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
promoter 5109..5156
/note="EM7 promoter"
/note="synthetic bacterial promoter "
CDS 5175..5573
/codon_start=1
/gene="Aspergillus terreus BSD"
/product="blasticidin S deaminase"
/note="Blast"
/note="confers resistance to blasticidin"
/translation="MAKPLSQEESTLIERATATINSIPISEDYSVASAALSSDGRIFTG
VNVYHFTGGPCAELVVLGTAAAAAAGNLTCIVAIGNENRGILSPCGRCRQVLLDLHPGI
KAIVKDSDGQPTAVGIRELLPSGYVWEG"
polyA_signal 5731..5852
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
protein_bind 5925..5941
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(5949..5979)
/note="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 5994..6015
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(6303..6891)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7062..7922)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7923..8027)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtcgactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggac tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc
901 accatggact acaaagacca tgacggtgat tataaagatc atgacatcga ttacaaggat
961 gacgatgaca agatggcccc caagaagaag aggaaggtgg gcattcaccg cggggtacct
1021 atggtggact tgaggacact cggttattcg caacagcaac aggagaaaat caagcctaag
1081 gtcaggagca ccgtcgcgca acaccacgag gcgcttgtgg ggcatggctt cactcatgcg
1141 catattgtcg cgctttcaca gcaccctgcg gcgcttggga cggtggctgt caaataccaa
1201 gatatgattg cggccctgcc cgaagccacg cacgaggcaa ttgtaggggt cggtaaacag
1261 tggtcgggag cgcgagcact tgaggcgctg ctgactgtgg cgggtgagct tagggggcct
1321 ccgctccagc tcgacaccgg gcagctgctg aagatcgcga agagaggggg agtaacagcg
1381 gtagaggcag tgcacgcctg gcgcaatgcg ctcaccgggg cccccttgaa cctgacccca
1441 gaccaggtag tcgcaatcgc gtcacatgac gggggaaagc aagccctgga aaccgtgcaa
1501 aggttgttgc cggtcctttg tcaagaccac ggccttacac cggagcaagt cgtggccatt
1561 gcatcccacg acggtggcaa acaggctctt gagacggttc agagacttct cccagttctc
1621 tgtcaagccc acgggctgac tcccgatcaa gttgtagcga ttgcgtcgaa cattggaggg
1681 aaacaagcat tggagactgt ccaacggctc cttcccgtgt tgtgtcaagc ccacggtttg
1741 acgcctgcac aagtggtcgc catcgcctcc aatattggcg gtaagcaggc gctggaaaca
1801 gtacagcgcc tgctgcctgt actgtgccag gatcatggac tgaccccaga ccaggtagtc
1861 gcaatcgcgt cgaacattgg gggaaagcaa gccctggaaa ccgtgcaaag gttgttgccg
1921 gtcctttgtc aagaccacgg ccttacaccg gagcaagtcg tggccattgc aagcaatggg
1981 ggtggcaaac aggctcttga gacggttcag agacttctcc cagttctctg tcaagcccac
2041 gggctgactc ccgatcaagt tgtagcgatt gcgtcgcatg acggagggaa acaagcattg
2101 gagactgtcc aacggctcct tcccgtgttg tgtcaagccc acggtttgac gcctgcacaa
2161 gtggtcgcca tcgccagcca tgatggcggt aagcaggcgc tggaaacagt acagcgcctg
2221 ctgcctgtac tgtgccagga tcatggactg accccaga
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