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首页 > 质粒载体 > 其他 > pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA人源基因调控质粒
pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA人源基因调控质粒
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pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA人源基因调控质粒
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基本信息
  • 产品名称： pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA人源基因调控质粒
  • 产品编号： P1036
  • 规格： 10μl质粒/300μl菌液
  • 启动子： mouse U6 promoter
  • 复制子： pUC ori,F1 ori,SV40 ori
  • 终止子： WPRE
  • 质粒分类： RNA文库质粒；RNA人源质粒；miRNA人源质粒
  • 质粒大小： 8994bp
  • 原核抗性： Amp（100μg/ml）
  • 筛选标记： EGFP,Puro
  • 克隆菌株： Stbl3
  • 培养条件： 37℃，LB，有氧
  • 表达宿主： 293T等哺乳细胞
  • 诱导方式： 无需诱导
  • 5测序引物： mU6-F（CAGCACAAAAGGAAACTCACC）
  • 3测序引物： SV40-R（GGACTTTCCACACCTGGTTG）
  • 质粒简介：          pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA质粒是在pLL3.7载体上克隆了一段非编码核苷酸序列得到的一个哺乳细胞慢病毒miRNA(MicroRNA)表达质粒。mU6启动Hsa-Let-7a-1miRNA的转录。该质粒可作为普通过表达质粒直接转染哺乳细胞，其是第三代慢病毒载体，所以也可包装成慢病毒侵染细胞。质粒本身同时带有EGFP荧光标签和Puro抗性标记，可利用EGFP来检测转染效率，或可用流式细胞仪和嘌呤霉素筛选转染后的细胞得到阳性克隆。
  • 质粒图谱：
  • 质粒序列： 点击查看序列
    LOCUS       Exported                8994 bp ds-DNA    circular SYN 09-七月-2017
    DEFINITION  .
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    pLL3.7-Hsa-Let-7a-1miRNA
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 8994)
      AUTHORS   XC
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported 2017年7月9日 from MiaoLingPlasmid
                http://www.snapgene.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..8994
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         enhancer        238..617
                         /note="CMV enhancer"
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        619..817
                         /note="CMV promoter"
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         LTR             835..1015
                         /note="5' LTR (truncated)"
                         /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
         misc_feature    1062..1187
                         /note="HIV-1 Psi"
                         /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 
                         type 1"
         misc_feature    1686..1919
                         /note="RRE"
                         /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 
                         Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 
                         cytoplasm."
         misc_feature    2446..2563
                         /note="cPPT/CTS"
                         /note="central polypurine tract and central termination 
                         sequence of HIV-1"
         promoter        2622..2933
                         /note="mU6 promoter"
                         /note="mouse U6 promoter"
         misc_feature    2949..2955
                         /note="Xho-SalI拼接点"
         misc_feature    2956..3304
                         /note="pri-hsa-miR-let-7a-1"
         misc_feature    3103..3182
                         /note="pre-hsa-let-7a-1"
         misc_feature    3103..3182
                         /note="pre-hsa-let-7a-1"
         promoter        3343..3672
                         /note="SV40 promoter"
                         /note="SV40 enhancer and early promoter"
         rep_origin      3523..3658
                         /note="SV40 ori"
                         /note="SV40 origin of replication"
         CDS             3688..4287
                         /codon_start=1
                         /gene="pac from Streptomyces alboniger"
                         /product="puromycin N-acetyltransferase"
                         /note="PuroR"
                         /note="confers resistance to puromycin"
                         /translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER
                         VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA
                         AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS
                         APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"
         primer_bind     4296..4312
                         /note="KS primer"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         protein_bind    4354..4387
                         /bound_moiety="Cre recombinase"
                         /note="loxP"
                         /note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core 
                         sequence (GCATACAT)."
         enhancer        4503..4806
                         /note="CMV enhancer"
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        4807..5010
                         /note="CMV promoter"
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         CDS             5055..5774
                         /codon_start=1
                         /product="enhanced GFP"
                         /note="EGFP"
                         /note="mammalian codon-optimized"
                         /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
                         KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
                         GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
                         VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
                         EFVTAAGITLGMDELYK"
         protein_bind    5794..5827
                         /bound_moiety="Cre recombinase"
                         /note="loxP"
                         /note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core 
                         sequence (GCATACAT)."
         misc_feature    5883..6471
                         /note="WPRE"
                         /note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional 
                         regulatory element"
         CDS             complement(6354..6365)
                         /codon_start=1
                         /product="Factor Xa recognition and cleavage site"
                         /note="Factor Xa site"
                         /translation="IEGR"
         primer_bind     complement(6474..6490)
                         /note="KS primer"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         LTR             7000..7180
                         /note="5' LTR (truncated)"
                         /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
         rep_origin      complement(7242..7830)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(8001..8861)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(8862..8966)
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
    ORIGIN
            1 gtcgacggat cgggagatct cccgatcccc tatggtgcac tctcagtaca atctgctctg
           61 atgccgcata gttaagccag tatctgctcc ctgcttgtgt gttggaggtc gctgagtagt
          121 gcgcgagcaa aatttaagct acaacaaggc aaggcttgac cgacaattgc atgaagaatc
          181 tgcttagggt taggcgtttt gcgctgcttc gcgatgtacg ggccagatat acgcgttgac
          241 attgattatt gactagttat taatagtaat caattacggg gtcattagtt catagcccat
          301 atatggagtt ccgcgttaca taacttacgg taaatggccc gcctggctga ccgcccaacg
          361 acccccgccc attgacgtca ataatgacgt atgttcccat agtaacgcca atagggactt
          421 tccattgacg tcaatgggtg gagtatttac ggtaaactgc ccacttggca gtacatcaag
          481 tgtatcatat gccaagtacg ccccctattg acgtcaatga cggtaaatgg cccgcctggc
          541 attatgccca gtacatgacc ttatgggact ttcctacttg gcagtacatc tacgtattag
          601 tcatcgctat taccatggtg atgcggtttt ggcagtacat caatgggcgt ggatagcggt
          661 ttgactcacg gggatttcca agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc
          721 accaaaatca acgggacttt ccaaaatgtc gtaacaactc cgccccattg acgcaaatgg
          781 gcggtaggcg tgtacggtgg gaggtctata taagcagcgc gttttgcctg tactgggtct
          841 ctctggttag accagatctg agcctgggag ctctctggct aactagggaa cccactgctt
          901 aagcctcaat aaagcttgcc ttgagtgctt caagtagtgt gtgcccgtct gttgtgtgac
          961 tctggtaact agagatccct cagacccttt tagtcagtgt ggaaaatctc tagcagtggc
         1021 gcccgaacag ggacttgaaa gcgaaaggga aaccagagga gctctctcga cgcaggactc
         1081 ggcttgctga agcgcgcacg gcaagaggcg aggggcggcg actggtgagt acgccaaaaa

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