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pECMV-3×FLAG-T7RNApolymerase聚合酶基因哺乳表达质粒
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pECMV-3×FLAG-T7RNApolymerase聚合酶基因哺乳表达质粒
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商品简介
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基本信息
产品名称:
pECMV-3×FLAG-T7RNApolymerase聚合酶基因哺乳表达质粒
产品编号:
P1758
规格:
10μl质粒/300μl菌液
原核抗性:
氨苄青霉素Amp
筛选标记:
遗传霉素G418
克隆菌株:
大肠杆菌DH5α
培养条件:
37℃
质粒简介:
pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase是一个哺乳细胞T7 RNA聚合酶表达质粒。
质粒图谱:
质粒序列:
点击查看序列
LOCUS Exported 8134 bp ds-DNA circular SYN 19-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8134
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
regulatory 913..922
/regulatory_class="other"
/note="vertebrate consensus sequence for strong initiation
of translation (Kozak, 1987)"
CDS 922..987
/codon_start=1
/product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an
enterokinase cleavage site"
/label=3xFLAG
/translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"
CDS 1033..3690
/codon_start=1
/label=T7 RNA polymerase
/translation="MNTINIAKNDFSDIELAAIPFNTLADHYGERLAREQLALEHESYE
MGEARFRKMFERQLKAGEVADNAAAKPLITTLLPKMIARINDWFEEVKAKRGKRPTAFQ
FLQEIKPEAVAYITIKTTLACLTSADNTTVQAVASAIGRAIEDEARFGRIRDLEAKHFK
KNVEEQLNKRVGHVYKKAFMQVVEADMLSKGLLGGEAWSSWHKEDSIHVGVRCIEMLIE
STGMVSLHRQNAGVVGQDSETIELAPEYAEAIATRAGALAGISPMFQPCVVPPKPWTGI
TGGGYWANGRRPLALVRTHSKKALMRYEDVYMPEVYKAINIAQNTAWKINKKVLAVANV
ITKWKHCPVEDIPAIEREELPMKPEDIDMNPEALTAWKRAAAAVYRKDKARKSRRISLE
FMLEQANKFANHKAIWFPYNMDWRGRVYAVSMFNPQGNDMTKGLLTLAKGKPIGKEGYY
WLKIHGANCAGVDKVPFPERIKFIEENHENIMACAKSPLENTWWAEQDSPFCFLAFCFE
YAGVQHHGLSYNCSLPLAFDGSCSGIQHFSAMLRDEVGGRAVNLLPSETVQDIYGIVAK
KVNEILQADAINGTDNEVVTVTDENTGEISEKVKLGTKALAGQWLAYGVTRSVTKRSVM
TLAYGSKEFGFRQQVLEDTIQPAIDSGKGLMFTQPNQAAGYMAKLIWESVSVTVVAAVE
AMNWLKSAAKLLAAEVKDKKTGEILRKRCAVHWVTPDGFPVWQEYKKPIQTRLNLMFLG
QFRLQPTINTNKDSEIDAHKQESGIAPNFVHSQDGSHLRKTVVWAHEKYGIESFALIHD
SFGTIPADAANLFKAVRETMVDTYESCDVLADFYDQFADQLHESQLDKMPALPAKGNLN
LRDILESDFAFAFA"
polyA_signal 3734..3958
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 4004..4432
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4446..4775
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 4626..4761
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
CDS 4842..5636
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 5810..5931
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(6382..6967)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7138..7998)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=Amp
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(7999..8103)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc
901 gtttaaactt aagccaccat ggactacaaa gaccatgacg gtgattataa agatcatgac
961 atcgactaca aggatgacga tgacaagctt ggtaccgagc tcggatccac tagtccagtg
1021 tggtggaatt ctatgaacac gattaacatc gctaagaacg acttctctga catcgaactg
1081 gctgctatcc cgttcaacac tctggctgac cattacggtg agcgtttagc tcgcgaacag
1141 ttggcccttg agcatgagtc ttacgagatg ggtgaagcac gcttccgcaa gatgtttgag
1201 cgtcaactta aagctggtga ggttgcggat aacgctgccg ccaagcctct catcactacc
1261 ctactcccta agatgattgc acgcatcaac gactggtttg aggaagtgaa agctaagcgc
1321 ggcaagcgcc cgacagcctt ccagttcctg caagaaatca agccggaagc cgtagcgtac
1381 atcaccatta agaccactct ggcttgccta accagtgctg acaatacaac cgttcaggct
1441 gtagcaagcg caatcggtcg ggccattgag gacgaggctc gcttcggtcg tatccgtgac
1501 cttgaagcta agcacttcaa gaaaaacgtt gaggaacaac tcaacaagcg cgtagggcac
1561 gtctacaaga aagcatttat gcaagttgtc gaggctgaca tgctctctaa gggtctactc
1621 ggtggcgagg cgtggtcttc gtggcataag gaagactcta ttcatgtagg agtacgctgc
1681 atcgagatgc tcattgagtc aaccggaatg gttagcttac accgccaaaa tgctggcgta
1741 gtaggtcaag actctgagac tatcgaactc gcacctgaat acgctgaggc tatcgcaacc
1801 cgtgcaggtg cgctggctgg catctctccg atgttccaac cttgcgtagt tcctcctaag
1861 ccgtggactg gcattactgg tggtggctat tgggctaacg gtcgtcgtcc tctggcgctg
1921 gtgcgtactc acagtaagaa agcactgatg cgctacgaag acgtttacat gcctgaggtg
1981 tacaaagcga ttaacattgc gcaaaacacc gcatggaaaa tcaacaagaa agtcctagcg
2041 gtcgccaacg taatcaccaa gtggaagcat tgtccggtcg aggacatccc tgcgattgag
2101 cgtgaagaac tcccgatgaa accggaagac atcgacatga atcctgaggc tctcaccgcg
2161 tggaaacgtg ctgccgctgc tgtgtaccgc aaggacaagg ctcgcaagtc tcgccgtatc
2221 agccttgagt tcatgcttga gcaagccaat aagtttgcta accataaggc catctggttc
2281 ccttacaaca tggactggcg cggtcgtgtt tacgctgtgt caatgttcaa cccgcaaggt
2341 aacgatatga ccaaaggact gcttacgctg gcgaaaggta aaccaatcgg taaggaaggt
2401 tactactggc tgaaaatcca cggtgcaaac tgtgcgggtg tcgataaggt tccgttccct
2461 gagcgcatca agttcattga ggaaaaccac gagaacatca tggcttgcgc taagtctcca
2521 ctggagaaca cttggtgggc tgagcaagat tctccgttct gcttccttgc gttctgcttt
2581 gagtacgctg gggtacagca ccacggcctg agctataact gctcccttcc gctggcgttt
2641 gacgggtctt gctctggcat ccagcacttc tccgcgatgc tccgagatga ggtaggtggt
2701 cgcgcggtta acttgcttcc tagtgaaacc gttcaggaca tctacgggat tgttgctaag
2761 aaagtcaacg agattctaca agcagacgca atcaatggga ccgataacga agtagttacc
2821 gtgaccgatg agaacactgg tgaaatctct gagaaagtca agctgggcac taaggcactg
2881 gctggtcaat ggctggctta cggtgttact cgcagtgtga ctaagcgttc agtcatgacg
2941 ctggcttacg ggtccaaaga gttcggcttc cgtcaacaag tgctggaaga taccattcag
3001 ccagctattg attccggcaa gggtctgatg ttcactcagc cgaatcaggc tgctggatac
3061 atggctaagc tgatttggga atctgtgagc gtgacggtgg tagctgcggt tgaagcaatg
3121 aactggctta agtctgctgc taagctgctg gctgctgagg tcaaagataa gaagactgga
3181 gagattcttc gcaagcgttg cgctgtgcat tgggtaactc ctgatggttt ccctgtgtgg
3241 caggaataca agaagcctat tcagacgcgc ttgaacctga tgttcctcgg tcagttccgc
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