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6-His-MBP-TEV-FnCpf1大肠敲除质粒
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6-His-MBP-TEV-FnCpf1大肠敲除质粒
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基本信息
产品名称:
6-His-MBP-TEV-FnCpf1大肠敲除质粒
产品编号:
P1736
规格:
10μl质粒/300μl菌液
启动子:
T7
复制子:
pBR322
终止子:
T7 ter
原核抗性:
氨苄青霉素Amp
克隆菌株:
大肠杆菌Stbl3
培养条件:
37℃
诱导方式:
IPTG
5测序引物:
T7
3测序引物:
T7-ter
质粒简介:
6-His-MBP-TEV-FnCpf1是一个大肠杆菌Cpf1表达质粒。
质粒图谱:
质粒序列:
点击查看序列
LOCUS Exported 10685 bp ds-DNA circular SYN 19-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..10685
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 532..1120
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 1306..1445
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(1547..1738)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/label=rop
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
CDS complement(2547..3629)
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/label=lacI
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
promoter complement(3630..3707)
/gene="lacI"
/label=lacI promoter
promoter 4016..4034
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 4035..4059
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 4074..4096
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 4110..4127
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/label=6xHis
/translation="HHHHHH"
misc_feature 4128..5243
/label=MBP
CDS 5244..5261
/codon_start=1
/product="thrombin recognition and cleavage site"
/label=thrombin site
/translation="LVPRGS"
CDS 5268..5288
/codon_start=1
/product="tobacco etch virus (TEV) protease recognition and
cleavage site"
/label=TEV site
/translation="ENLYFQG"
misc_feature 5289..9188
/label=FnCpf1 (humanized)
CDS 9189..9236
/codon_start=1
/product="bipartite nuclear localization signal from
nucleoplasmin"
/label=nucleoplasmin NLS
/translation="KRPAATKKAGQAKKKK"
CDS 9243..9323
/codon_start=1
/product="three tandem HA epitope tags"
/label=3xHA
/translation="YPYDVPDYAYPYDVPDYAYPYDVPDYA"
terminator 9516..9563
/label=T7 terminator
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
rep_origin 9600..10055
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 10081..10185
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 10186..361
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
ORIGIN
1 gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgcagcaa tggcaacaac
61 gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga
121 ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg
181 gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtggtagt cgcggtatca ttgcagcact
241 ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac
301 tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta
361 actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt
421 taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga
481 gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc
541 tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt
601 ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc
661 gcagatacca aatactgtcc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc
721 tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg
781 cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg
841 gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga
901 actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc
961 ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg
1021 gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg
1081 atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt
1141 tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacatg ttctttcctg cgttatcccc
1201 tgattctgtg gataaccgta ttaccgcctt tgagtgagct gataccgctc gccgcagccg
1261 aacgaccgag cgcagcgagt cagtgagcga ggaagcggaa gagcgcctga tgcggtattt
1321 tctccttacg catctgtgcg gtatttcaca ccgcaatggt gcactctcag tacaatctgc
1381 tctgatgccg catagttaag ccagtataca ctccgctatc gctacgtgac tgggtcatgg
1441 ctgcgccccg acacccgcca acacccgctg acgcgccctg acgggcttgt ctgctcccgg
1501 catccgctta cagacaagct gtgaccgtct ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac
1561 cgtcatcacc gaaacgcgcg aggcagctgc ggtaaagctc atcagcgtgg tcgtgaagcg
1621 attcacagat gtctgcctgt tcatccgcgt ccagctcgtt gagtttctcc agaagcgtta
1681 atgtctggct tctgataaag cgggccatgt taagggcggt tttttcctgt ttggtcactg
1741 atgcctccgt gtaaggggga tttctgttca tgggggtaat gataccgatg aaacgagaga
1801 ggatgctcac gatacgggtt actgatgatg aacatgcccg gttactggaa cgttgtgagg
1861 gtaaacaact ggcggtatgg atgcggcggg accagagaaa aatcactcag ggtcaatgcc
1921 agcgcttcgt taatacagat gtaggtgttc cacagggtag ccagcagcat cctgcgatgc
1981 agatccggaa cataatggtg cagggcgctg acttccgcgt ttccagactt tacgaaacac
2041 ggaaaccgaa gaccattcat gttgttgctc aggtcgcaga cgttttgcag cagcagtcgc
2101 ttcacgttcg ctcgcgtatc ggtgattcat tctgctaacc agtaaggcaa ccccgccagc
2161 ctagccgggt cctcaacgac aggagcacga tcatgcgcac ccgtggggcc gccatgccgg
2221 cgataatggc ctgcttctcg ccgaaacgtt tggtggcggg accagtgacg aaggcttgag
2281 cgagggcgtg caagattccg aataccgcaa gcgacaggcc gatcatcgtc gcgctccagc
2341 gaaagcggtc ctcgccgaaa atgacccaga gcgctgccgg cacctgtcct acgagttgca
2401 tgataaagaa gacagtcata agtgcggcga cgatagtcat gccccgcgcc caccggaagg
&nbs
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