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首页 > 质粒载体 > 病毒系列载体 > pLKO.1-EGFP-Puro慢病毒干扰RNA质粒
pLKO.1-EGFP-Puro慢病毒干扰RNA质粒
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pLKO.1-EGFP-Puro慢病毒干扰RNA质粒
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基本信息
  • 产品名称： pLKO.1-EGFP-Puro慢病毒干扰RNA质粒
  • 产品编号： P1717
  • 规格： 10μl质粒/300μl菌液
  • 原核抗性： 氨苄青霉素Amp
  • 筛选标记： 嘌呤霉素Puro，绿色荧光蛋白EGFP
  • 克隆菌株： 大肠杆菌Stbl3
  • 培养条件： 37℃
  • 表达宿主： 哺乳细胞
  • 质粒简介：                pLKO.1-EGFP-Puro是一个哺乳细胞慢病毒干扰RNA质粒。
  • 质粒图谱：
  • 质粒序列： 点击查看序列
    LOCUS       Exported                8301 bp ds-DNA     circular SYN 14-DEC-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..8301
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        7..507
                         /label=hPGK promoter
                         /note="human phosphoglycerate kinase 1 promoter"
         CDS             529..1128
                         /codon_start=1
                         /gene="pac from Streptomyces alboniger"
                         /product="puromycin N-acetyltransferase"
                         /label=PuroR
                         /note="confers resistance to puromycin"
                         /translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER
                         VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA
                         AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS
                         APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"
         LTR             1256..1489
                         /label=3' LTR (Delta-U3)
                         /note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from
                         HIV-1"
         polyA_signal    1561..1682
                         /label=SV40 poly(A) signal
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      1722..1857
                         /label=SV40 ori
                         /note="SV40 origin of replication"
         rep_origin      2064..2519
                         /direction=RIGHT
                         /label=f1 ori
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        2545..2649
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
         CDS             2650..3510
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         rep_origin      3681..4269
                         /direction=RIGHT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         promoter        4738..4964
                         /label=RSV promoter
                         /note="Rous sarcoma virus enhancer/promoter"
         LTR             4965..5145
                         /label=5' LTR (truncated)
                         /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
         misc_feature    5192..5317
                         /label=HIV-1 Psi
                         /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 
                         type 1"
         misc_feature    5810..6043
                         /label=RRE
                         /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 
                         Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 
                         cytoplasm."
         promoter        6570..6810
                         /label=U6 promoter
                         /note="RNA polymerase III promoter for human U6 snRNA"
         enhancer        6832..7135
                         /label=CMV enhancer
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        7136..7339
                         /label=CMV promoter
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         regulatory      7368..7377
                         /regulatory_class="other"
                         /note="vertebrate consensus sequence for strong initiation 
                         of translation (Kozak, 1987)"
         CDS             7374..8093
                         /codon_start=1
                         /product="enhanced GFP"
                         /label=EGFP
                         /note="mammalian codon-optimized"
                         /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
                         KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
                         GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK
                         VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL
                         EFVTAAGITLGMDELYK"
         misc_feature    8132..8249
                         /label=cPPT/CTS
                         /note="central polypurine tract and central termination 
                         sequence of HIV-1"
    ORIGIN
            1 ttggggttgc gccttttcca aggcagccct gggtttgcgc agggacgcgg ctgctctggg
           61 cgtggttccg ggaaacgcag cggcgccgac cctgggtctc gcacattctt cacgtccgtt
          121 cgcagcgtca cccggatctt cgccgctacc cttgtgggcc ccccggcgac gcttcctgct
          181 ccgcccctaa gtcgggaagg ttccttgcgg ttcgcggcgt gccggacgtg acaaacggaa
          241 gccgcacgtc tcactagtac cctcgcagac ggacagcgcc agggagcaat ggcagcgcgc
          301 cgaccgcgat gggctgtggc caatagcggc tgctcagcag ggcgcgccga gagcagcggc
          361 cgggaagggg cggtgcggga ggcggggtgt ggggcggtag tgtgggccct gttcctgccc
          421 gcgcggtgtt ccgcattctg caagcctccg gagcgcacgt cggcagtcgg ctccctcgtt
          481 gaccgaatca ccgacctctc tccccagggg gatccaccgg agcttaccat gaccgagtac
          541 aagcccacgg tgcgcctcgc cacccgcgac gacgtcccca gggccgtacg caccctcgcc
          601 gccgcgttcg ccgactaccc cgccacgcgc cacaccgtcg atccggaccg ccacatcgag
          661 cgggtcaccg agctgcaaga actcttcctc acgcgcgtcg ggctcgacat cggcaaggtg
          721 tgggtcgcgg acgacggcgc cgcggtggcg gtctggacca cgccggagag cgtcgaagcg
          781 ggggcggtgt tcgccgagat cggcccgcgc atggccgagt tgagcggttc ccggctggcc
          841 gcgcagcaac agatggaagg cctcctggcg ccgcaccggc ccaaggagcc cgcgtggttc
          901 ctggccaccg tcggcgtctc gcccgaccac cagggcaagg gtctgggcag cgccgtcgtg
          961 ctccccggag tggaggcggc cgagcgcgcc ggggtgcccg ccttcctgga gacctccgcg
         1021 ccccgcaacc tccccttcta cgagcggctc ggcttcaccg tcaccgccga cgtcgaggtg
         1081 cccgaaggac cgcgcacctg gtgcatgacc cgcaagcccg gtgcctgacg cccgccccac
         1141 gacccgcagc gcccgaccga aaggagcgca cgaccccatg catcggtacc tttaagacca
         1201 atgacttaca aggcagctgt agatcttagc cactttttaa aagaaaaggg gggactggaa
         1261 gggctaattc actcccaacg aagacaagat ctgctttttg cttgtactgg gtctctctgg
         1321 ttagaccaga tctgagcctg ggagctctct ggctaactag ggaacccact gcttaagcct
         1381 caataaagct tgccttgagt gcttcaagta gtgtgtgccc gtctgttgtg tgactctggt
         1441 aactagagat ccctcagacc cttttagtca gtgtggaaaa tctctagcag tagtagttca
         1501 tgtcatctta ttattcagta tttataactt gcaaagaaat gaatatcaga gagtgagagg
         1561 aacttgttta ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca
         1621 aataaagcat ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct
         1681 tatcatgtct ggctctagct atcccgcccc taactccgcc catcccgccc ctaactccgc
         1741 ccagttccgc ccattctccg ccccatggct gactaatttt ttttatttat gcagaggccg
         1801 aggccgcctc ggcctctgag ctattccaga agtagtgagg aggctttttt ggaggcctag
         1861 ggacgtaccc aattcgccct atagtgagtc gtattacgcg cgctcactgg ccgtcgtttt
         1921 acaacgtcgt gactgggaaa accctggcgt tacccaactt aatcgccttg cagcacatcc
         1981 ccctttcgcc agctggcgta atagcgaaga ggcccgcacc gatcgccctt cccaacagtt
         2041 gcgcagcctg aatggcgaat gggacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt
         2101 ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc
         2161 tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg
         2221 gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta
         2281 gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt
         2341 ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat
         2401 ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa
         2461 tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaattta
         2521 ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga acccctattt gtttattttt ctaaatacat
         2581 tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa ccctgataaa tgcttcaata atattgaaaa
         2641 aggaagagta tgagtattca acatttccgt gtcgccctta ttcccttttt tgcggcattt
         2701 tgccttcctg tttttgctca cccagaaacg ctggtgaaag taaaagatgc tgaagatcag
         2761 ttgggtgcac gagtgggtta catcgaactg gatctcaaca gcggtaagat ccttgagagt
         2821 tttcgccccg aagaacgttt tccaatgatg agcactttta aagttctgct atgtggcgcg
         2881 gtattatccc gtattgacgc cgggcaagag caactcggtc gccgcataca ctattctcag
         2941 aatgacttgg ttgagtactc accagtcaca gaaaagcatc ttacggatgg catgacagta
         3001 agagaattat gcagtgctgc cataaccatg agtgataaca ctgcggccaa cttacttctg
         3061 acaacgatcg gaggaccgaa ggagctaacc gcttttttgc acaacatggg ggatcatgta
         3121 actcgccttg atcgttggga accggagctg aatgaagcca taccaaacga cgagcgtgac
         3181 accacgatgc ctgtagcaat ggcaacaacg ttgcgcaaac tattaactgg cgaactactt

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