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pLV-dCas9-p300-P2A-PuroR哺乳CAS9表达质粒
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pLV-dCas9-p300-P2A-PuroR哺乳CAS9表达质粒
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基本信息
  • 产品名称： pLV-dCas9-p300-P2A-PuroR哺乳CAS9表达质粒
  • 产品编号： P1650
  • 规格： 10μl质粒/300μl菌液
  • 原核抗性： 氨苄青霉素Amp
  • 筛选标记： 嘌呤霉素Puro，博来霉素Zeo
  • 克隆菌株： 大肠杆菌Stbl3
  • 培养条件： 37℃
  • 质粒简介：              pLV-dCas9-p300-P2A-PuroR哺乳CAS9表达质粒。
  • 质粒图谱：
  • 质粒序列： 点击查看序列
    LOCUS       Exported               14538 bp ds-DNA     circular SYN 04-DEC-2017
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..14538
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         LTR             533..766
                         /label=3' LTR (Delta-U3)
                         /note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from
                         HIV-1"
         polyA_signal    798..1022
                         /label=bGH poly(A) signal
                         /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
         rep_origin      1068..1496
                         /direction=RIGHT
                         /label=f1 ori
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        1510..1839
                         /label=SV40 promoter
                         /note="SV40 enhancer and early promoter"
         rep_origin      1690..1825
                         /label=SV40 ori
                         /note="SV40 origin of replication"
         promoter        1887..1934
                         /label=EM7 promoter
                         /note="synthetic bacterial promoter "
         CDS             1953..2327
                         /codon_start=1
                         /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
                         /product="antibiotic-binding protein"
                         /label=Zeo
                         /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 
                         Zeocin(TM)"
                         /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
                         VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
                         EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
         polyA_signal    2457..2578
                         /label=SV40 poly(A) signal
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         rep_origin      complement(3029..3617)
                         /direction=LEFT
                         /label=ori
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(3788..4648)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /label=AmpR
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(4649..4753)
                         /gene="bla"
                         /label=AmpR promoter
         enhancer        5019..5398
                         /label=CMV enhancer
                         /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
         promoter        5400..5598
                         /label=CMV promoter
                         /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 
                         promoter"
         LTR             5616..5796
                         /label=5' LTR (truncated)
                         /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
         misc_feature    5843..5968
                         /label=HIV-1 Psi
                         /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 
                         type 1"
         misc_feature    6461..6694
                         /label=RRE
                         /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 
                         Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 
                         cytoplasm."
         misc_feature    7221..7338
                         /label=cPPT/CTS
                         /note="central polypurine tract and central termination 
                         sequence of HIV-1"
         promoter        7458..7669
                         /label=EF-1-alpha core promoter
                         /note="core promoter for human elongation factor 
                         EF-1-alpha"
         regulatory      7688..7697
                         /regulatory_class="other"
                         /note="vertebrate consensus sequence for strong initiation 
                         of translation (Kozak, 1987)"
         CDS             7694..11797
                         /codon_start=1
                         /product="catalytically dead mutant of the Cas9 
                         endonuclease from the Streptococcus pyogenes Type II 
                         CRISPR/Cas system"
                         /label=dCas9
                         /note="RNA-guided DNA-binding protein that lacks 
                         endonuclease activity due to the D10A mutation in the RuvC 
                         catalytic domain and the H840A mutation in the HNH 
                         catalytic domain"
                         /translation="MDKKYSIGLAIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKK
                         NLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEES
                         FLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIK
                         FRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRL
                         ENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQ
                         IGDQYADLFLAAKNLSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVR
                         QQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLL
                         RKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARG
                         NSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEY
                         FTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFD
                         SVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER
                         LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFM
                         QLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGR
                         HKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLY
                         LYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVDAIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVP
                         SEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKH
                         VAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYL
                         NAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKT
                         EITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSK
                         ESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGI
                         TIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNE
                         LALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILAD
                         ANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVL
                         DATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGD"
         CDS             11798..11845
                         /codon_start=1
                         /product="bipartite nuclear localization signal from 
                         nucleoplasmin"
                         /label=nucleoplasmin NLS
                         /translation="KRPAATKKAGQAKKKK"
         CDS             11852..13702
                         /codon_start=1
                         /gene="EP300"
                         /product="catalytic histone acetyltransferase core of the 
                         human E1A-associated protein p300 (Delvecchio et al., 
                         2013)"
                         /label=p300 core
                         /translation="IFKPEELRQALMPTLEALYRQDPESLPFRQPVDPQLLGIPDYFDI
                         VKSPMDLSTIKRKLDTGQYQEPWQYVDDIWLMFNNAWLYNRKTSRVYKYCSKLSEVFEQ
                         EIDPVMQSLGYCCGRKLEFSPQTLCCYGKQLCTIPRDATYYSYQNRYHFCEKCFNEIQG
                         ESVSLGDDPSQPQTTINKEQFSKRKNDTLDPELFVECTECGRKMHQICVLHHEIIWPAG
                         FVCDGCLKKSARTRKENKFSAKRLPSTRLGTFLENRVNDFLRRQNHPESGEVTVRVVHA
                         SDKTVEVKPGMKARFVDSGEMAESFPYRTKALFAFEEIDGVDLCFFGMHVQEYGSDCPP
             

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